2019-09-04
? ? ? ? ?苏丹红Ⅰ~ Ⅳ号均为人工合成的一系列偶氮类工业染料。?#33455;?#34920;明,其原型及代谢产物均有一定的潜在致癌作用。近年来?#35775;?#21644;我国都禁止苏红作为食品添加剂使用。但是由于苏丹红成本?#22303;?#39068;色鲜艳,不易褪色,一些不法商?#26041;?#33487;丹红添加到鸡鸭饲料、?#33519;分?#21697;、调味品等食品中,极大地危害了消?#39068;?#30340;健康。
? ? ? ? 目前,国内关于苏丹红的检测方法主要参考《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效?#21512;?#33394;谱法》国家标准。?#19979;?#31185;技在此标准基础上,将番茄沙司样品经正己烷提取后,使用ProElut SDH 苏丹红检测专用固相萃取柱进行净化,高效?#21512;?#33394;谱法检测。
方法特点如下:
1. 净化过程使用商品化的苏丹红检测专用固相萃取柱,无需按照国标方法进行层析柱的填?#26114;?#20013;性氧化铝的活度调整,避免了中性氧化铝活度容?#36164;?#29615;境影响而引起苏丹红回收率不稳定的弊端;
2. 使用ProElut SDH 苏丹红检测专用固相萃取柱重?#20013;?#21644;回收?#24335;?#26524;更加稳定可靠;
3. 方法检测限10 μg/kg,与国标GB/T 19681-2005要求最低检测限相同。
以下为详细解决方案,敬请参考!
番茄沙司中苏丹红的测定SPE-HPLC法
1、适用范围
本方法适用于番茄沙司中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的检测,检测限10 μg/kg。
2、标准品配制
混合标准储备液:各准确称取10 mg标准品,用乙醚溶解后,用正己烷定容至100 mL,配制成100 μg/mL的混合标准储备液。
混合标准中间液:准确吸取10 μL和100 μL的100 μg/mL混合标准储备液,挥干,用乙腈分别稀释成1.0 μg/mL和10 μg/mL的混合标准中间液。
3、提取
(1) 取5.0 g样品,加入20 mL正己烷混合,振荡5 min,超声提取5 min,8000 rpm下离心2 min,收集上清液
(2) 将下层残留物用20 mL正己烷按照步骤(1)重复提取一?#21361;?#21512;并两次上清液;
(3) 将上清液在40 ℃水浴条件下,减压蒸?#20004;?#24178;,再加入5 mL正己烷混匀,待净化。
4、净化—— ProElut SDH 6 mL(Cat.# 65909)
a活??? 化: 5 mL正己烷活化;
b上??? 样: 加入待净化液,控制流速1滴/秒,弃去流出液;
c淋??? 洗: ?#26469;?#21152;入5 mL正己烷,5 mL 1%乙酸乙酯正己烷,控制流速1滴/秒,弃去流出液;
d洗??? 脱: 加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷,控制流速1滴/秒,收集流出液;
e重新溶解: 将洗脱液在40 ℃?#24405;?#21387;蒸干,用乙腈定容至1 mL,供HPLC分析。
5、分析条件
色谱柱:Diamonsil C18(2), 250 × 4.6 mm, 5 μm(Cat# 99603)
流? 速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱? 温:40 ℃
检测器:PDA 518 nm
流动相:A:0.2% 磷酸水溶液?????? B:乙腈
梯度设置
时间/Min. | 0 | 18 | 20 | 50 | 52 | 60 |
A(%) | 12 | 12 | 0 | 0 | 12 | 12 |
B(%) | 88 | 88 | 100 | 100 | 88 | 88 |
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6、添加回收结果
番茄沙司中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的HPLC检测添加回收结果
化合物名称 | 回收率(%) | |
添加水平:10 μg/kg | 添加水平:100 μg/kg | |
加标量:1.0 μg/mL,加50 μL | 加标量:10 μg/mL,加50 μL | |
苏丹红Ⅰ | 97.41 | 98.98 |
苏丹红Ⅱ | 98.70 | 100.84 |
苏丹红Ⅲ | 110.48 | 89.97 |
苏丹红Ⅳ | 102.21 | 93.64 |
番茄沙司中苏丹红的测定SPE-HPLC法相关产品信息:
货号 | 名称 | 规格 |
样品前处理 | ||
65909 | 苏丹红检测专用固相萃取柱 ProElut SDH | 6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用连接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正压两用泵,无油 | 1/pk |
99013 |
抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) |
1/pk |
30039 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm, 0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm, 0.45 μm 100/pk |
? | ||
99603 | 反相高效?#21512;?#33394;谱柱 Diamonsil C18(2)? | 250 × 4.6 mm, 5 μm |
6201 | EasyGuard C18 保护柱套装 |
10 × 4.0 1个柱套 + 2个柱芯 |
标准品 | ||
50P-C16986101 | 苏丹红Ⅰ[842-07-9] | 250 mg |
50P-C16986102 | 苏丹红Ⅱ[3118-97-6] | 250 mg |
50P-C16986103 | 苏丹红Ⅲ[85-86-9]? | 250 mg |
50P-C16986104 | 苏丹红Ⅳ[85-83-6] | 250 mg |
HPLC溶剂&缓冲盐&离子对试剂 | ||
50101 | 乙腈 HPLC级 | 4L |
50115 | 正己烷 HPLC级 | 4L |
50104 | 乙酸乙酯 HPLC级 | 4L |
50133 | 磷酸 HPLC级 | 50mL |
通用色谱产品 | ||
52401B | 瓶架/蓝色 | 50孔 |
52401A | 瓶架/?#21672;?/td> | 50孔 |
1034 | 样品瓶(棕色/螺纹) | 2 mL, 100/pk |
1035 | 样品瓶盖/含垫(已经组装) | 100/pk |
H80465 | HPLC 进样针 | 25 μL |
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